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                      土壤基因組DNA提取試劑盒

                      貨號:DK022
                      包裝:50T
                      價格:375
                      儲存:RT

                      詳細描述

                       

                      本試劑盒采用獨特的脫腐緩沖液體系,可將土壤樣本中的腐殖酸、棕黃酸盡可能去除,并且配有得玻璃珠可有效破碎土壤樣本中的各種復雜成分,保證從土壤樣本中提取基因組DNA的完整性。使用本試劑盒提取的DNA雜質少、完整性好,可直接用于PCR、酶切等其他分子生物學下游實驗。

                      【使用說明】

                      1.      裂解緩沖液、Solution S1、Solution S2、Solution S3在低溫條件下會產生沉淀,使用前放入37水浴,完全溶解后使用。

                      2.      所有離心步驟均為使用臺式離心機室溫下進行離心。

                      【提取步驟】

                      1.     0.25g玻璃珠和500ul 裂解緩沖液至2ml離心管中。

                      2.     向上述2 ml離心管中加入0.25-0.5g土壤樣品,渦旋混勻。

                      3.     向離心管中加入60 ul Solution S1,渦旋混勻,65℃水浴10min后劇烈渦旋震蕩10min。

                      v  為獲得更好的裂解效果,可適當延長水浴和渦旋震蕩時間

                      4.     10,000 rpm離心3min,轉移上清(約400ul)至新的2ml離心管中。

                      v  由于劇烈震蕩,離心后上層可能會有泡沫,建議轉移上清時采用傾倒的方式,盡量不要將泡沫轉移到新的離心管中。

                      5.     向上清中加入3倍體積的Solution S2,上下顛倒混勻,12,000 rpm離心1min。

                      6.     轉移上清至新的2ml離心管中,加入1/4體積的異丙醇,上下顛倒混勻。

                      7.     將上一步溶液加到吸附柱中,12,000 rpm離心30s。

                      v  吸附柱最大載量700ul,請分多次過柱。

                      8.     棄廢液,向吸附柱中加600μl Solution S3,12,000 rpm離心1min。

                      9.     向吸附柱中加入600μl漂洗液 WB(請先檢查是否已加入無水乙醇!,12,000rpm 離心30s,棄掉廢液。

                      10.  向吸附柱中加入400μl 漂洗液WB, 12,000 rpm離心30秒,棄掉廢液。

                      11.  將吸附柱放回空收集管中,12,000 rpm離心1min,盡量除去漂洗液。

                      v  漂洗液中乙醇的殘留會影響后續的酶反應(酶切、PCR等)實驗。也可以將吸附柱開蓋,置于室溫放置數分鐘,以徹底晾干吸附材料中殘余的乙醇。

                      12.  小心取出吸附柱,放入一個滅菌的離心管中,在吸附膜的中間部位加 50ul 洗脫緩沖液EB或者TE(洗脫緩沖液事先在60-70浴中加熱效果更好),室溫放置 2 分鐘,12,000rpm離心1min。如果需要較多量DNA,可將得到的溶液重新加入離心吸附柱中,再離心1min。

                      v  洗脫體積越大, 洗脫效率越高。如果需要DNA濃度較高, 可以適當減少洗脫體積,但是最小體積不應少于 30ul。

                      v  本試劑盒提供兩種洗脫液EBTE。EB10mM Tris-HCl ,pH8.0),不含EDTA,不影響下游酶切、連接等反應。如DNA需長期保存,可以用TE10mM Tris-HCl,1mM EDTA,pH8.0)洗脫,但是EDTA可能影響下游酶切反應。

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