• <b id="wbes9"></b>
        1. <b id="wbes9"><small id="wbes9"><ol id="wbes9"></ol></small></b>
            1. <b id="wbes9"><address id="wbes9"><ol id="wbes9"></ol></address></b>

            2. <u id="wbes9"></u>
            3. 
              
              <b id="wbes9"><address id="wbes9"><kbd id="wbes9"></kbd></address></b>

            4. <u id="wbes9"><small id="wbes9"></small></u>
                    1. 技術資源您現在的位置 :首頁 - 技術資源

                      【小配方】2、電泳緩沖液、染料和凝膠加樣液配制方法

                      日期時間:2016-01-30     文章來源:本站     點擊量:2312


                      1、10mg/ml的溴化乙錠(ethidium bromide):

                          小心稱取1g溴化乙錠,轉移到廣口瓶中,加100ml水,用磁力攪拌器攪拌直到溶解,分裝成小份4℃避光保存。



                      2、電泳緩沖液

                      50×Tris-乙酸(TAE)緩沖液

                      成分及終濃度

                      配制1L溶液各成分的用量

                      2mol/L Tris
                      1mol/L
                      乙酸
                      100 mmol/L EDTA

                      242g
                      57.1 ml
                      的冰乙酸(17.4 mol/L
                      200ml
                      0.5 mol/L EDTApH 8.0
                      補足1L





                      3、5×Tris-硼酸(TBE)緩沖液

                      成分及終濃度

                      配制1L溶液各成分的用量

                      445 mmol/L Tris
                      445 mmol/L
                      硼酸鹽
                      10 mmol/L EDTA

                      54g
                      27.5g
                      硼酸
                      20 ml
                      0.5 mol/L EDTApH 8.0
                      補足1L





                      4、6×DNA Loading buffer蔗糖凝膠上樣液(室溫貯存)

                      成分及終濃度

                      配制10ml溶液各成分用量

                      0.15%溴酚藍
                      0.15
                      %二甲苯青FF
                      5 mmol/L EDTA
                      40
                      %聚蔗糖

                      1.5ml 1%溴酚藍
                      1.5ml 1
                      %二甲苯青FF
                      100ul 0.5mol/L EDTA
                      pH8.0
                      4g
                      補足到10ml



                      5、10×DNA Loading buffer(終止反應)十二烷基硫酸鈉/甘油凝膠上樣液(室溫貯存)

                      成分及終濃度

                      配制10ml溶液各成分用量

                      0.2%溴酚藍
                      0.2
                      %二甲苯青FF
                      200 mmol/L EDTA
                      0.1
                      SDS
                      50
                      %甘油

                      20mg
                      20mg
                      4ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0)
                      100ul 10
                      SDS
                      5ml
                      補足到10ml



                      6、30%(W/VAcrylamide

                      組份濃度 30%(W/VAcrylamide 0.05
                      配制量 1L
                      配置方法 :

                      1.稱量下列試劑,置于1L燒杯中

                      Acrylamide         290g

                      BIS                10g
                      2.向燒杯中加入約600mL的去離子水,充分攪拌溶解
                      3.
                      加入去離子水將溶液定容至1L,用0.45μm濾膜濾去雜質。
                      4.
                      于棕色瓶中4℃保存。
                      注意:丙稀銑胺具有很強的神經毒性,并可通過皮膚吸收,其作用有積累性,配制時應戴手套等。聚丙烯酰胺無毒,但也應謹慎操作,因為有可能含有少量的未聚合成份。



                      7、40%(W/VAcrylamide

                      組份濃度 40%(W/VAcrylamide 0.05
                      配制量 1L
                      配置方法

                      1.稱量下列試劑,置于1L燒杯中
                      Acrylamide     380g
                      BIS            20g
                      2.
                      向燒杯中加入約600mL的去離子水,充分攪拌溶解
                      3.
                      加入去離子水將溶液定容至1L,用0.45μm濾膜濾去雜質。
                      4.
                      于棕色瓶中4℃保存。
                      注意:丙稀銑胺具有很強的神經毒性,并可通過皮膚吸收, 其作用有積累性,配制時應戴手套等。聚丙烯酰胺無 毒,但也應謹慎操作,因為有可能含有少量的未聚合成份。



                      8、10%(W/V)過硫酸銨

                      組份濃度 10%(W/V)過硫酸銨 
                      配制量      10mL 
                      配置方法

                      1.稱取1g過硫酸銨。 
                      2.加入10mL的去離子水后攪拌溶解。 
                      3.貯存于4℃。 
                      注意:10%過硫酸胺溶液在4℃保存時間可使用2周左右, 超過期限會失去催化作用。



                      9、考馬斯亮藍R-250染色液

                      組份濃度 0.1%(W/V)考馬斯亮藍R-250,25%(V/V)異丙醇, 10%(V/V)冰醋酸 
                      配制量      1L 
                      配置方法

                      1.稱取1g考馬斯亮藍R-250,置于1L燒杯中。 
                      2.量取250mL的異丙醇加入上述燒杯中,攪拌溶解。
                      3.加入100mL的冰乙醋酸,均勻攪拌。 
                      4.加入650mL的去離子水,均勻攪拌。 
                      5.用濾紙出去顆粒物質后,室溫保存。



                      10、考馬斯亮藍染色脫色液

                      組份濃度 10%(V/V)醋酸,5%(V/V)乙醇 
                      配制量 1L 
                      配置方法

                      1.量取下列溶液,置于1L燒杯中。 
                      醋酸     100mL 
                      乙醇     50mL 
                      dH2O     850mL 
                      2.充分混合后使用。



                      11、顯影液

                      組份濃度 0.005%(V/V)檸檬酸,0.02%(V/V)甲醛(SDS-PAGE銀氨染色用)          

                      配制量 1L 
                      配置方法

                      1.稱取下列試劑,置于1L試劑瓶中。 
                      檸檬酸 50mg 
                      甲醛 0.2mL 
                      2.加入1L去離子水后,搖動混合后溶解。 
                      3.室溫保存。




                      12、5×Tris-GlycineBuffer           

                      組份濃度 0.125M Tris,1.25M Glycine,0.5%(w/v)SDS 
                      (SDS-PAGE電泳緩沖液)       

                      配制量       1L 
                      配置方法

                      1.稱取下列試劑,置于1L燒杯中。 
                      Tris           15.1g 
                      Glycine        94g 
                      SDS            5.0g 
                      2.加入約800mL的去離子水,攪拌溶解。 
                      3.加去離子水將溶液定容至1L后,室溫保存。





                      首頁 | 產品 | 服務 | 合作 | 資源 Copyright © 2014 江蘇溥博生物科技有限公司 版權所有 蘇ICP備14044946號-1 蘇公網安備 32031202000395號

                      蘇-公網安備 32031202000395號


                      天天日天天干,天天爱天天做天天爽,超碰国产人人做人人爽,天天日影院,天天舔--,天天插,天天狠,天天干